Products

Analîzkirina bûyerên fosforîlasyona proteome-berfireh hîn jî pirsgirêkek analîtîkî ya sereke ye ji ber tevliheviya mezin a torên fosforîlasyona proteînê.Di vê xebatê de, em temamkeriya Lys-N, Lys-C, û trypsin di derbarê kapasîteya wan de ku beşdarî analîza gerdûnî ya fosfoproteome bibin dinirxînin.Guhertoyek safîkirî ya danûstendina kationê ya bi pH-ya nizm hate bikar anîn da ku peptîdên N-terminal acetilated, fosforylated, û ne-modified bi bandor veqetînin.Bi tevahî 5036 fosfopeptîdên bêserûber dikarin bi rêjeyek vedîtina derewîn a <1% ji 1 mg proteîn bi karanîna tevliheviya sê enzîman werin nas kirin.Daneyên me eşkere kirin ku hevbendiya di navbera komên daneya fosphopeptide ku bi proteazên cihêreng têne hilberandin marjînal bû, di heman demê de hevgirtina di navbera du komên daneyên trîptîkî yên ku bi heman rengî hatine çêkirin de bi kêmî ve 4 qat zêde bû.Bi vî rengî, karanîna paralel a Lys-N û trîpsînê ji sedî 72 zêdebûnek di hejmara fosfopeptîdên naskirî de li gorî d bi trîpsîn tenê re peyda kir, lê ceribandinek dubarekirina trypsin tenê bû sedema zêdebûna 25%.Ji ber vê yekê, dema ku bi tenê li ser daneyên trypsin û Lys-N-ê hûr dibe, me 4671 fosfopeptîdên bêserûber nas kir.Analîzên din ên malperên ku hatine tespît kirin destnîşan kir ku daneyên Lys-N û trypsin di motîfên fosforîlasyonê yên girîng ên cihêreng de dewlemend bûne, ku bêtir eşkere dike ku nêzîkatiyên pirprotease di analîzên phosphoproteome de pir bi qîmet in.