Products

Monogalaktopyranosîdên fluorescein û fluorescein methyl ester: sentez, hîdrolîza enzîmatîk ji hêla β-galactosidase biotnylated, û destnîşankirina hevrêziya belavkirina wergerandinê

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) û d-glucopyranoside) û metyl ester (MFMG) ji acetobromoglucose / galaktoz û fluorescein methyl ester di hilberên baş de hatine amadekirin.Ceribandinên hîdrolîza enzîmatîk (bi bikaranîna β-galactosidase biotinylated) yên galakto-derivative hatine kirin û parametreyên kînetîk hatine hesibandin.Di dema hîdrolîzê de 15-20 qat zêdebûnek xurtbûna floransê hatiye dîtin.Zêdebûnek xêzikî ya fluorescence di demek kurt de û hûrbûna kêm a substratê de hate destnîşan kirin, ku van pêkhateyan ji bo galaktosîdazan lêkolînên kêrhatî û hesas dike.Mezinahiya nirxa domdar Michaelis-Menten (Km) ji bo MFMG ji ya FMG mezintir e ku guherînek konformasyonel a muhtemel a substrata fluorogenic pêşniyar dike.Nirxa km ji bo β-Galê biotinylated bi FMG ji ya enzîma xwemalî kêmtir e.Ev çavdêrî li gorî enzîma xwemalî girêdana substratê ya enzîma biotinylated bilindtir nîşan dide.Hem ji bo substratên fluorogenîk û hem jî ji bo her du hilberan, bi karanîna spektroskopiya pêwendiya fluorescence-ê, hevrêzên belavkirina werger hatine pîvandin.Rêjeya belavkirina wergerî ya ji bo substratên fluorogenîk û hilberên hîdrolîza enzîmatîk wekî hev in, di rêza 3,5-4,5 × 10-10 m2 s-1 de hatine pîvandin.Ji ber vê yekê zêdebûn an paşveçûnek kînetîka enzîmatîk ji ber cûdahiya tevgera wergerî ya substrat û hilberê ne ew qas xuya ye.