Products

Nêrînên mekanîzmayî yên li ser malbatek alpha-mannosidases-girêdayî Ca2+-ê ya di hembêzek zikê mirovan de.

Bakteriyên kolonî, ku ji hêla Bacteroides thetaiotaomicron ve têne nimûne, di parastina tenduristiya mirovan de bi karanîna malbatên mezin ên hîdrolasên glycoside (GHs) re rolek sereke dilîze da ku polîsakarîdên parêz û glycansên mêvandar wekî xurek bikar bînin.Berfirehbûna malbata GH ya wusa ji hêla 23 glycosidasesên malbata GH92 ve ku ji hêla genomê B. thetaiotaomicron ve hatî kod kirin ve tête nimûne.Li vir em destnîşan dikin ku ev alpha-mannosîdase ne ku bi mekanîzmayek yekane veguheztinê tevdigerin da ku N-glycansên mêvandar bikar bînin.Struktura sê-alî ya du mannosîdazên GH92 malbatek proteînên du-dominî diyar dike ku tê de navenda katalîtîk li navbeynkariya domanê ye, arîkariya asîd (glutamate) û bingeh (aspartat) ji hîdrolîzê re di Ca(2+)- de peyda dike. awayê girêdayî.Strukturên sê-alî yên GH92-ên tevlihev ên bi înhîbîtoran re di derheqê taybetmendî, mekanîzma û rêwîtiya konformasyonê ya katalîzasyonê de têgihiştinê peyda dikin.Ca(2+) roleke katalîtîk a sereke dilîze di alîkariya guheztina mannoside ku ji konformasyona kursiya wê ya zemîn (4)C(1) ber bi rewşa veguhêz ve bibe. (Bibliography: Nat.Chem.Biol.6, 125-32, (2010)

Kromatografiya pêwendiya pêşiyê ya glycoasparagines ovalbumin li ser stûnek concanavalin A-sepharose.Lêkolînek hejmarî ya taybetmendiya girêdanê ya lectin.

Têkiliyên Sepharose 4B-concanavalin A (ConA) bi 10 glycoasparagînên ku ji ovalbuminê ve têne derxistin ji hêla kromatografiya pêwendiya pêşiyê ve ji hêla mîqdar ve hatin lêkolîn kirin.Di vê rêbazê de, çareseriyek karbohîdartê bi domdarî li stûnek ConA-Sepharose tê sepandin û paşveçûna eniya elûkirinê wekî pîvanek hêza pêwendiyê tê pîvandin.Berdewama veqetandinê (Kd) ji bo her sakkarîdek bi ConA dikare were destnîşankirin.Analîzek girêdana p-nitrophenyl-alpha, D-mannoside destnîşan kir ku taybetmendiyên girêdanê yên ConA bi bingehîn piştî bêbandorkirina li ser Sepharose 4B nayê guhertin.Her yek ji glycoasparaginesên ovalbumin ji bo analîzê bi rêbaza methylasyonê ya kêmker bi trîtium ve hatî nîşankirin.Berawirdkirina nirxên Kd yên ku hatine bidestxistin destnîşan kir ku girêdana ConA bi cûdahiyên strukturî yên pir sivik ên zincîra glycosyl re pir diguhere.Encam destnîşan dikin ku ConA avahiyek zincîra glycosylê ya taybetî nas dike, Man alpha 1-6 (Man alpha 1-3)Man, ku tê de herî kêm komek hîdroksîl li pozîsyona C-3 ya manoza C-6-girêdayî divê azad be.