Products

Fêmkirina metabolîzma mêvandarê mîkrobîkî ji bo pêşkeftin û xweşbînkirina pêvajoyên biocatalytîk ên bingehîn ên hucreyê pêdivî ye, ji ber ku ew karbidestiya hilberînê ferz dike.Ev bi taybetî ji bo biocatalysis redox rast e ku hucreyên metabolîk aktîf têne xebitandin ji ber kapasîteya vejenê ya kofaktor/cosubstrate ku di nav mêvandar de endojen e.Escherichia coli ya rekombînant ji bo hilberîna zêde ya proline-4-hydroxylase (P4H) hate bikar anîn, dioksîjenazek ku hîdroksîlkirina L-prolina belaş di nav trans-4-hîdroksî-L-prolîn de bi a-ketoglutarate (a-KG) re wekî cosubstrate katalîze dike.Di vê biokatalîsterê tev-hucreyê de, metabolîzma karbonê ya navendî cosubstrate a-KG peyda dike, performansa biocatalîtîka P4H rasterast bi metabolîzma karbonê û çalakiya metabolê re têkildar dike.Bi sepandina hem amûrên biyolojiya ezmûnî û hem jî hesabkerî, wek endezyariya metabolîk û (13) analîza herikîna metabolîk C ((13) C-MFA), me bersiva fîzyolojîk, metabolîk û biyoenerjîk a biyokatalîzatorê tev-hucreyê vekolîn û bi qastî rave kirin. ji bo biyoveguheztina armanckirî û ji bo endezyariya rêgeza maqûl a din girêkên metabolîk ên muhtemel tesbît kirin. Kêmasiyek E. coli ya kêmbûna proline bi jêbirina gena putA ya ku proline dehydrogenase kod dike hate çêkirin.Biotransformasyonên tev-hucreyê bi vê çenga mutant re ne tenê rê li ber hîdroksîlasyona proline ya mîqdar, lê di heman demê de li gorî celebê çolê, rêjeya pêkhatina trans-4-L-hîdroksîproline (hyp) ya taybetî jî ducar kir.Analîza herikîna karbonê bi navgîniya metabolîzma navendî ya tîrêja mutant ve diyar kir ku zêdebûna daxwaziya a-KG ya ji bo çalakiya P4H, herikîna hilberîna a-KG zêde nekir, ku di bin şert û mercên lêkolînê de operasyonek çerxa TCA-ya hişk-rêkûpêk destnîşan dike.Di cureya çolê de, sentez û katalîzasyona P4H bû sedema kêmbûna hilberîna biomassê.Balkêş e, çenga ΔputA ji bilî zêdekirina çalakiya TCA-ê, bi kêmkirina daxwazên enerjiyê yên lênihêrînê bi rêjeyên girtina glukozê kêm kêm dike, ji bilî zêdekirina çalakiya TCA, windabûna ATP û NADH-ê ya têkildar jî telafî kir. ji bo katalîzasyona hilberîner a P4H ne tenê di warê hilberîna biyotransformasyonê de, lê di heman demê de di derbarê rêjeyên biyotransformasyonê û girtina proline û hilberîna hîp li ser çavkaniya enerjiyê de jî sozdar be.Encam destnîşan dikin ku, li ser têkçûnek putA, hevgirtina TCA-cycle bi hîdroksîlasyona proline re bi navgîniya cosubstrate a-KG dibe faktorek bingehîn a astengker û armancek ji bo baştirkirina kargêriya biyotransformasyonên girêdayî a-KG.