Products

Topolojiya membranê ya qada kanala colicin E1 ji hêla veguheztina enerjiya resonansê ya fluorescence (FRET) ve hate lêkolîn kirin.FRET wekî donor asîdek floransent a genetîka kodkirî (coumarin) û bermayîyek cysteine ​​ya bijartî ya ku bi DABMI (4-(dimethylamino) phenylazophenyl-4'-maleimide) ve wekî qebûlkerê FRET ve girêdayî ye, vedigire.Bermayiya kumarînê ya fluorescent bi navgîniya cotek tRNA/aminoacyl-tRNA ortogonal a synthetase ku destûr da tevlêbûna bijartî li her cîhek di nav qada kanala kolicin de di nav proteînê de hate bicîh kirin.Her guhertoyek mutasyonek rawestanê (TAG) ji bo tevlêbûna kumarînê û mutasyonek cysteine ​​(TGT) ji bo girêdana DABMI vedihewand.Şeş dûrahiyên navhelîkal ên di nav helîkên 1-6 de bi karanîna analîza FRET hem ji bo dewletên çareserker û hem jî yên girêdayî membranê hatin destnîşankirin.Daneyên FRET guheztinên mezin di mesafeyên navhelîkî yên di nav helîkên 3-6 de li ser komeleya membranê destnîşan kir ku di derheqê struktur-girêdana membranê ya qada kanalê de têgihiştinek nû peyda dike.Bi gelemperî, karbidestiya navhelîk a coumarin-DABMI FRET li ser girêdana membranê kêm bû, ku li ser modela sîwanê ji bo kanala kolicin ava dibe.Modelek ceribandinê ji bo rewşa girtî ya domaina kanalê li ser bingeha daneyên FRET yên heyî û berê hatine weşandin hate pêşve xistin.Modela rêkûpêkkirina dorhêlê ya helîkan 1-7 bi rêgezek demjimêrê ji hêla derveyî hucreyî û komeleya navrûya parzûnê ya helîkên 1, 6, 7, û 10-ê li dora porê transmembrane ya navendî ya ku ji hêla helîkên 8 û 9 ve hatî çêkirin, pêşniyar dike.